知母皂苷成分的分离及结构鉴定文献综述

知母皂苷成分的分离及结构鉴定

一、研究背景

　　知母，别名连母、水须、穿地龙、虫氏母、地参；英文名称为：RhizomaAnemarrhenae(拉);commonanemarrhenarhizome；百合科植物知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.的干燥根茎。主产河北、安徽亳州、山西、内蒙、陕西及东北等地。春、秋二季采挖，除去须及泥沙，晒干，习称毛知母。或除去外皮，晒干。切片入药，生用，或盐水炙用。药性：苦、甘，寒。归肺、胃、肾经。功效：清热泻火，生津润燥。清热泻火，生津润燥。用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘。前人研究表明，知母含有较多活性成分，具有较强的药理作用，在前人研究基础上，在查阅多人研究成果后，现对于知母活性成分特别是皂苷，及药理作用综述如下。

二．文献综述　　

知母具有较强的药理作用1.解热作用.知母浸膏4g/kg皮下注射，能防止和治疗大肠杆菌所致兔高热，且作用持久．知母根茎中所含皂甙具有明显降低由甲状腺素造成的耗氧率增高及抑制Na ,K -ATP酶活性的作用．2．抗病原微生物作用.体外实验表明：知母煎剂对葡萄球菌、伤寒杆菌有较强的抑制作用,对痢疾杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、霍乱弧菌、变形杆菌、白喉杆菌、肺炎双球菌、beta;-溶血性链球菌、白色念珠菌等也有不同程度的抑制作用．知母乙醇浸膏、乙醚浸膏及乙醚浸膏加丙酮处理后所得之粗结晶，对在普、拜培养基上培养的H37RV人型结核杆菌亚种有较强的抑制作用，其中乙醚浸膏的抗结核杆菌的抑菌效价最高．而皂甙则无作用．但有报道从知母中提得一种水溶性皂甙，对结核杆菌，尤其对白色念珠菌有较强的抑制作用；而另一种黄酮结晶，对结核杆菌也有抑制作用．对豚鼠实验性结核病以3%知母药饵治疗3～4个月，有较好疗效；也可减轻实验性结核小鼠的肺部病变，但死亡率并不降低；如将药物浓度提高到5%，则肺结核指数（反映肺脏大体病变的情况）可接近异烟肼，但死亡率却较对照组更高，可能系因药物本身毒性较大所致．此外，8%～20%浓度的知母煎剂在沙伯培养基上对许兰毛癣菌、共心性毛癣菌、堇色毛癣菌等常见的致病性皮肤癣菌也有抑菌作用．亦有报道指出，知母皂甙有灭螺作用．3．对血糖的影响　给正常家兔注射知母干浸膏（6g/kg）后，对血糖无影响，醇提取物可引起暂时性的血糖升高．知母水浸提取物，能降低正常兔的血糖水平，特别是对四氧密啶性糖尿病兔作用更为显著．白虎加人参汤（知母、人参、甘草）的提取物0.5～1g/kg腹腔注射，对实验性糖尿病小鼠亦有降低血糖的作用，给药后6小时下降120mg%．对正常大鼠，知母不能增进葡萄糖的氧化，虽可促进横膈、脂肪组织对葡萄糖的摄取，使横膈中糖元含量轻度增加，但肝糖元含量却有所降低．对实验性（四氧嘧啶）糖尿病的小鼠，腹腔注射知母水性提取物0.15g/kg,5小时血糖下降200mg%，尿中酮体减少．4．对皮质激素作用的影响　大鼠服用滋阴降火中药生地知母甘草汤或其中的单味药，均能使受地塞米松抑制的血浆皮质醇浓度升高，并有防止肾上腺萎缩的作用．生地知母甘草汤和激素同时服用，能减少激素的副作用．知母皂甙元（菝葜皂甙元）与知母水煎剂相似，能明显降低高甲状腺激素状态小鼠脑beta;-受体RT值，但对亲和力无影响，还能显著地改善该状态小鼠的体重下降．5．其他作用:知母浸膏对妊娠兔离体子宫无显著影响．从西陵知母根茎中分得beta;-谷甾醇治疗皮肤鳞癌、宫颈癌有较好疗效且无副作用．知母皂甙抗肿瘤的作用机制同其对细胞膜的泵的强烈抑制作用有关．知母中所含的烟酸，有维持皮肤与神经健康及促进消化道功能的作用．从知母叶中提得的芒果甙有明显的利胆作用；亦能抑制血小板聚集．

知母的主要成分：知母药材根茎中含总皂甙，其中有知母皂甙（Timosaponin）A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ，B-Ⅰ和B-Ⅱ．其中知母皂甙A-Ⅰ是萨尔萨皂甙元beta;-D-吡喃半乳糖甙，知母皂甙A-Ⅲ是萨尔萨皂甙元与知母双糖（Timobiose）结合而成的双糖甙．知母根茎中的皂甙元有萨尔萨皂甙元（Sarsasapogenin）、吗尔考皂甙元（Markogenin）、新芰脱皂甙元（Neogitogenin）．以前从知母中分离出来的皂甙知母宁（Asphonin）是吗尔考皂甙、知母皂甙A-Ⅲ、A-Ⅳ、B等的混合物．亦分离出异菝葜皂甙元（Smilagenin）等皂甙类成分．　尚含有黄酮类的芒果甙（Mangiferin,Chi-monin），异芒果甙（Isomangiferin）；生物碱类的胆碱（Choline），尼克酰胺（Nicotinamide）；有机酸类的鞣酸（Tannicacid），烟酸（Nicotinicacid）以及四种知母多糖（AnemarnA,B,C,D）．另外尚含铁、锌、锰、铜、铬、镍等多种金属元素以及黏液质、还原糖等．

三、实验流程

1、实验材料和试剂

色谱级乙腈、色谱级水、色谱级甲酸