开题报告内容:
- 课题背景
单核细胞增生李斯特菌简称“单增李斯特菌”是一种广泛分布于自然界的人畜共患食源性致病菌,它能引起人、畜的李斯特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多,特别对孕妇、新生儿、老年人和免疫缺陷病人危害严重。超高压技术是一种非热的加工方式,不仅能有效控制食品中的致病微生物,还能最大程度地保存食品原有的一些天然风味和口感等。研究表明,在食品加工过程中,通过加热、冷冻、干燥、辐射、高静水压、发酵、加抗菌药物等方法处理食品后,食源性致病菌会出现3种生理状态不同的细胞:正常的细胞、处于亚致死损伤状态的细胞和死亡细胞。单增李斯特菌受超高压处理后,细菌菌数显著减少,但在一定的环境和食品介质中,受超高压胁迫的单增李斯特菌能够修复,使处于亚致死损伤状态的细菌可能导致食品二次污染,一旦进入人体便会存在潜在危害,给食品安全保障带来严重隐患。本课题旨在以受超高压处理的单增李斯特菌为研究对象,研究不同的修复条件对其修复的影响。
- 拟解决的问题
1. 单增李斯特菌的增殖培养;
2. 探究不同修复条件(如温度、pH、代谢抑制剂和金属离子等)对超高压处理后的单增李斯特菌修复的影响;
3. 平板计数法记录细菌菌落数和实验数据的计算分析;
4. 超高压胁迫单增李斯特菌在实际生活的应用。
- 研究方法和内容
1.培养基的配制
(1)LB1、LB2液体培养基:称取李氏增菌肉汤(LB1,LB2)基础49.4 g于1 L蒸馏水中,加热至完全溶解,121 ℃高压蒸汽灭菌15 min备用。每225 mL基础中无菌加入萘啶酮酸和吖啶黄素各一支,制成LB1液体培养基。每200 mL基础中无菌加入萘啶酮酸和吖啶黄素各一支,制成LB2液体培养基,备用。
(2)含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(Trypticase Soy-Yeast Extract Agar, TSA-YE):称取46.5 g于1 L蒸馏水中,加热至完全溶解,121 ℃高压蒸汽灭菌15 min备用。
(3)PALCAM培养基:称取PALCAM培养基基础71.9 g于1 L蒸馏水中,加热至完全溶解,121 ℃高压蒸汽灭菌15 min备用。每100 mL中无菌加入PALCAM选择性添加剂一支。
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