开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究的主要目的和意义
基质金属蛋白酶（MMPs）是一个大家族，几乎能降解ECM中的各种蛋白成分,Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类，它主要有两种形式，一种被糖化，分子量为92kD，命名为MMP-9;另一种非糖化，分子量为72kD，被称为MMP-2。经前期实验研究发现，P2是中性粒细胞释放的MMP-2和MMP-9的抑制剂，其可以抑制MMP-2和MMP-9，但P2在小鼠体内半衰期较短。为延长P2半衰期，采用PEG修饰。本课题拟采用PEG5K修饰P2，用酶切法检测小鼠血液中PEG-P2单体的浓度变化，并与未修饰的P2比较，通过比较分析判断PEG5K修饰对P2半衰期的延长情况。
阅读文献发现，有几种方法可以检测PEG-P2在血液中的浓度，其中，ELISA方法检测特定表位的存在，它检测的是单体和二聚体的总浓度；用酶切法检测的是PEG-P2对酶活力的抑制作用，及单体形式的浓度。本实验拟将酶切法检测的PEG-P2单体浓度的结果与ELISA方法检测结果比较，多角度相结合以更好地解释PEG-P2保护内毒素休克小鼠的机制。
二、研究内容
1.聚乙二醇化的基质金属蛋白酶抑制剂PEG5K-P2的制备
2.动物分组及注射
3.血液样品的预处理
4.酶切法检测PEG5K-P2单体浓度方法的建立
5.血液样品中PEG5K-P2单体浓度的检测
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