开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一. 拟研究或解决的问题
缺血/缺氧性心脏损伤是心血管疾病致死致残的一个主要原因。并且临床上缺血-再灌注患者自身伴随有多种心血管疾病风险因素(如肥胖、高血脂、高血压、心衰、胰岛素抵抗、糖尿病及年老等)的长期存在,而心肌组织或细胞线粒体途径(糖和脂肪酸有氧氧化)和非线粒体途径(糖酵解)能量代谢紊乱是上述风险因素和缺血/再灌注损伤的重要病理基础。这些危险因素可以明显降低缺血预适应及药物保护效应。为此,基于心肌细胞能量代谢稳态调节,有效对抗心肌缺血-再灌注损伤并提高研发药物其转换到临床应用的机率具有重要意义。本课题拟基于调控心肌细胞能量代谢平衡,改善脂肪酸过度氧化促进葡萄糖氧化利用,从而达到改善心肌缺氧复氧损伤,观察人参皂苷Rb1的作用效果及分子机制
二. 研究手段
本课题首先通过棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激使细胞缺氧,探究药物在缺氧情况下对糖脂代谢改善的机制。之后在PA刺激后依次对细胞进行糖氧剥夺与复氧操作,造成缺氧/再灌注模型,探讨药物在PA刺激引起缺氧的条件下通过调节糖脂代谢改善缺氧/再灌注损伤的机制。
1.(1)培养H9c2心肌细胞,分为空白对照组、模型组、人参皂苷Rb1低剂量组、人参皂苷Rb1中剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组与阳性药对照组。除空白对照组外采用PA刺激2h,用western blot方法检测CPT-1与p-PDH/PDH表达水平。
(2)采用哌莫硝唑染色法测定各组细胞缺氧情况。
(3)测定各组中乳酸生成情况
2.(1)培养细胞,分组为空白对照组、模型组1、模型组2、人参皂苷Rb1低剂量组、人参皂苷Rb1中剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组与阳性药对照组。其中,模型组1仅进行糖氧剥夺缺氧4h而后复氧1h;模型组2、人参皂苷Rb1低剂量组、人参皂苷Rb1中剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组与阳性药对照组先用PA刺激2h后再进行糖氧剥夺4h而后复氧1h。用western blot测定各组p-PDH/PDH表达水平
(2)测定各组乳酸生成情况。
以上是毕业论文开题文献,课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。