开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
课题背景:
目的研究表明,在恶性肿瘤患者体内,普遍存在着免疫抑制和免疫逃逸的一种微环境,使患者免疫系统的功能存在不同程度的抑制[1]。其中环磷酰胺是一种细胞毒性药物,能杀死有丝分裂和进入循环周期的细胞,具有较强的免疫抑制作用,这种抑制效应体现在减轻免疫器官重量、抑制巨噬细胞活性、抑制T细胞增殖及抗体分泌等[5]。一方面,多种肿瘤组织提取液、培养液及肿瘤宿主的血清、腹水均已证实有肿瘤免疫抑制因子存在。另一方面,治疗恶性肿瘤的化疗药物会不可避免的对机体免疫功能造成一定程度的损伤[2-3]。因此为了减轻化疗药物对机体产生的毒副作用,我们尝试从多糖中为开发无毒或低毒的抗肿瘤药物找到一种新的渠道。
多糖是一类分子量均一的大分子化合物,在动植物种广泛存在。在研究中发现多糖的生物学活性主要集中在免疫调节,抗肿瘤,抗病毒和降血糖方面[4]。有相关实验研究结果表明,900 mg/kg的车前草多糖能明显提高通过腹腔注射环磷酰胺( 80 mg/kg) 造成免疫低下的小鼠的廓清指数,增强其炭粒廓清功能,增强免疫低下小鼠迟发型变态反应,提高其血清中溶血素水平,且对模型小鼠的体重减轻、脾脏与胸腺萎缩有缓解作用,可增强免疫低下小鼠的免疫功能[6]。近几年来,国内多糖类药物增强机体免疫功能的研究成为当前的研究热点。
地鳖虫( Eupolyphaga sinensis Walker)属于昆虫纲,蜚蠊目鳖蠊科,又称土元,具有破血淤、散坚节、解凝治血、接筋续骨、消肿止痛等功能,资料记载地鳖虫对白血病和肿瘤等疾病也具有一定的疗效。干燥地鳖虫全虫经预处理、粉碎、热水浸提、木瓜蛋白酶-Sevag 法除蛋白、乙醇沉淀后得到地鳖虫多糖ESPS[8]。通过前期实验,我们发现ESPS或许可以逆转环磷酰胺对免疫抑制小鼠产生免疫增强作用。
因此本课题以环磷酰胺作为细胞免疫、体液免疫中的免疫抑制模型的诱导药物,建立体内和体外模型,来研究通过从燥地鳖虫中提取的多糖ESPS逆转环磷酰胺从而对免疫抑制活性产生的影响。
预期实验方法:
1.预期实验材料
1.1 原料
ESPS
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