开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 实验目的:
本研究旨在探究融合蛋白GnRH-GRP(G3G6)和HSP65-STEAP1(HST1)致敏树突状细胞(DC)效果和致敏后DC对B16F10黑色素瘤的抑制杀伤作用。
2. 实验方法:
2.1融合蛋白的制备
利用实验室现存含有重组质粒pET28a-GnRH3-hinge-MVP-GRP6和pET28a-His- HSP65-STEAP1186-193工程菌表达融合蛋白GnRH-GRP(G3G6)和HSP65-STEAP1(HST1),提取融合蛋白并纯化。
2.2 DC疫苗的制备
按未致敏DC(US-DC) 组,G3G6融合蛋白致敏DC(G3G6-DC)组,HST1融合蛋白致敏DC( HST1-DC)组和G3G6及HST1联合致敏DC( GH-DC) 组致敏小鼠骨髓来源的DC分化成熟,获得融合蛋白致敏的相应DC疫苗。
2.3 DC疫苗的药效探究
将B16F10黑色素瘤细胞以移植于C57BL/6J雄性小鼠构建黑色素瘤模型,DC疫苗免疫治疗,体内外实验探究DC疫苗的抗肿瘤药效。
DC疫苗及其抗肿瘤研究进展
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