拟研究问题：新型融合蛋白2A9 -NKG2DLs的构建及表达。
2A9是实验室筛选出来的抗BCMA单链抗体，NKG2DLs是NKG2D（NK细胞表面）受体，本课题试图通过基因工程手段构建和表达此种双功能蛋白，利用2A9对BCMA的靶向性和NKG2DLs对NK细胞的特异结合性，来达到在多发性骨髓瘤区域招募NK细胞从而治疗骨髓瘤的目的。
研究手段：从基因库中找出NKG2DLs、G4S（linker）等序列，（2A9实验室已保有相关序列片段），并设计引物序列，在Snapgene中进行编辑。
之后对DNA序列进行分段的PCR，并进行琼脂糖凝胶电泳和胶回收等步骤，最后通过Overlap PCR进行片段融合，完成目的序列的构建。
之后制备DH5alpha;感受态细胞，转化感受态细胞后送公司测序。
获得结果正确的重组载体后，接下来进行重组载体质粒提取，最后转染真核体系进行扩增表达。
文献综述：本课题构建的是一种Fv抗体融合蛋白，2A9是一种抗B细胞成熟抗原（BCMA）的ScFv单链抗体，NKG2DLs是指诱发性自体蛋白NKG2D的配体，期望2A9-NKG2DLs融合蛋白可以将NK细胞招募至骨髓瘤细胞附近，通过同时结合效应细胞和靶细胞，利用NK细胞的细胞毒作用靶向杀伤肿瘤，达到治疗多发性骨髓瘤的目的。
NK细胞是具有杀伤溶解靶细胞能力的免疫细胞，它是一种对先天性免疫和适应性免疫至关重要的淋巴细胞亚群，起源于骨髓中的造血祖细胞[1]。
其细胞毒作用主要有以下途径：释放穿孔素和颗粒酶；Fas-FasL途径；TNF/TNFR-1途径；释放NK细胞毒因子；ADCC效应[2]。
以上是毕业论文开题文献，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
