PEG10K-P2活性形式在小鼠体内浓度的变化及与ELISA检测结果的比较文献综述

 2023-02-15 18:38:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一.拟研究的问题

基质金属蛋白酶(MMPs)是一个大家族,几乎能降解ECM中的各种蛋白成分,Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类,它主要有两种形式,一种被糖化,分子量为92kD,命名为MMP-9;另一种非糖化,分子量为72kD,被称为MMP-2。经前期实验研究发现,P2是中性粒细胞释放的MMP-2和MMP-9的抑制剂,其可以抑制MMP-2和MMP-9。但P2在小鼠体内半衰期较短,为延长其半衰期,采用PEG修饰。有几种方法可以检测PEG-P2在血液中的浓度,其中,ELISA方法检测特定表位的存在,它检测的是单体和二聚体的总浓度;用酶切法检测的是PEG10K-P2对酶活力的抑制作用,及单体形式的浓度。本课题主要用酶切法检测血液中PEG10K-P2单体的浓度,并于ELISA方法检测结果比较,更好的解释PEG-P2保护内毒素休克小鼠的机制。

.实验方法

本实验的研究包括以下几项内容:

1.聚乙二醇化的基质金属蛋白酶抑制剂SC-PEG-P2的制备

2.动物分组及注射

3.血液样品的预处理

4.酶活力方法的建立

5.检测血液样品中的PEG10K-P2的有效浓度与ELISA方法比较。

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